Leasachadh air dòigh ELISA neo-dhìreach airson a bhith a’ lorg porcine acute diarrhea syndrome coronavirus IgG antibody stèidhichte air pròtain spìc ath-chuingealaichte

Tha Porcine Acute Diarrhea Syndrome Coronavirus (SADS-CoV) na coronavirus pathogenic enteric pathogenic a chaidh a lorg às ùr a dh’ adhbhraicheas a ’bhuineach uisgeach ann am mucan ùra agus a dh’ adhbhraicheas call mòr eaconamach do ghnìomhachas nam muc.Aig an àm seo, chan eil dòigh seròlach iomchaidh ann airson measadh a dhèanamh air èifeachdas galair SADS-CoV agus banachdach, agus mar sin tha feum èiginneach air assay immunosorbent ceangailte le enzyme (ELISA) èifeachdach a chleachdadh gus dèanamh suas airson an easbhaidh seo.An seo, chaidh plasmid ath-chuingealaichte a’ nochdadh pròtain SADS-CoV spike (S) air a cheangal ri fearann ​​​​IgG Fc daonna a thogail gus baculovirus ath-chuingealaichte a thoirt gu buil agus air a chuir an cèill ann an ceallan HEK 293F.Tha am pròtain S-Fc air a ghlanadh le roisinn pròtain G agus a’ cumail an reactivity le antibodies an-aghaidh daonna Fc agus anti-SADS-CoV.An uairsin chaidh pròtain S-Fc a chleachdadh gus ELISA neo-dhìreach (S-iELISA) a leasachadh agus gus suidheachadh freagairt S-iELISA a bharrachadh.Mar thoradh air an sin, le bhith a’ dèanamh anailis air luach OD450nm de sera àicheil 40 SADS-CoV air a dhearbhadh le assay immunofluorescence (IFA) agus blotting an Iar, chaidh an luach gearraidh a dhearbhadh mar 0.3711.Bha an co-èifeachd atharrachaidh (CV) den sera dearbhach 6 SADS-CoV taobh a-staigh agus eadar ruith de S-iELISA uile nas lugha na 10%.Sheall an deuchainn tar-reactivity nach eil tar-reactivity aig S-iELISA le sera bhìoras porcine eile.A bharrachd air an sin, stèidhichte air lorg sampallan serum clionaigeach 111, b’ e ìre co-thuiteamas iomlan IFA agus S-iELISA 97.3%.Sheall an deuchainn neodachadh bhìoras le 7 diofar luachan OD450nm de serum gu robh an luach OD450nm a chaidh a lorg le S-iELISA ceangailte gu dearbhach ris an deuchainn neodachadh bhìoras.Mu dheireadh, chaidh S-iELISA a dhèanamh air sampallan serum tuathanas muc 300.Sheall innealan malairteach de enteroviruses muc eile gu robh ìrean adhartach IgG de SADS-CoV, TGEV, PDCoV agus PEDV aig 81.7%, 54%, agus 65.3%, fa leth., 6%, fa leth.Tha na toraidhean a’ sealltainn gu bheil an S-iELISA sònraichte, mothachail, agus ath-ghintinn, agus faodar a chleachdadh gus galar SADS-CoV a lorg ann an gnìomhachas nam muc.Tha an artaigil seo air a dhìon le dlighe-sgrìobhaidh.Còraichean uile glèidhte.


Ùine a’ phuist: Jun-22-2021